Procédé et dispositif de séparation des constituants d’un mélange complexe de protéines en vue d’une analyse protéomique

Method for separating the constituents of a complex mixture of proteins to submit to proteomic analysis and apparatus therefor

Abstract

A method and an apparatus for separating the constituents of a complex mixture of proteins, for example an organic fluid, such as blood plasma, to submit to proteomic analysis. The method comprises, in particular, a step of distributing the complex mixture of proteins on a determined number n of separation elements different from each other (101). Each separation element separates a determined group of proteins from the other proteins present in the complex mixture (102) according to determined criteria. The proteins thus isolated from each separation element are diluted and neutralised (103) for being then sent to an analytic instrument, for example a column for high resolution liquid chromatography, or HPLC (104b), and then a spectrometer of MS type, or of MS /MS type. Each separation element has particular chemical -physical features that capture by adsorption only the proteins belonging to a determined group, i.e. having similar features.
Procédé et dispositif de séparation des constituants d’un mélange complexe de protéines, par exemple un liquide organique tel que du plasma sanguin, en vue d’une analyse protéomique. Le procédé consiste, en particulier, à répartir le mélange complexe de protéines entre un nombre déterminé n d’éléments de séparation différents les uns des autres (101). Chaque élément de séparation permet de séparer un groupe déterminé de protéines des autres protéines présentes dans le mélange complexe (102) en fonction de critères déterminés. Les protéines ainsi isolées de chaque élément de séparation sont diluées et neutralisées (103) en vue de leur transfert vers un instrument d’analyse tel qu’un colonne pour chromatographie liquide haute performance, Ou HPLC, (104b), puis vers un spectromètre de type MS, ou de type MS/MS. Chaque élément de séparation présente des caractéristiques physico-chimiques propres qui capturent par adsorption les seules protéines appartenant à un groupe déterminé, c’est-à-dire présentant des caractéristiques analogues.

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